aislar bacterias del suelo es un primer paso importante en muchos experimentos de microbiolog铆a. Una vez que est谩n aisladas, las bacterias pueden analizarse m谩s a fondo para determinar cosas, como su especie y su funci贸n en el ambiente del suelo. incluso una peque帽a cantidad de suelo puede contener millones de bacterias, lo que hace necesario diluir una muestra de suelo antes de aislar las bacterias de la muestra.
medir 100 ml. Agua destilada en el cilindro graduado y agregarlo a la botella est茅ril.
pesar 1 g de la muestra de suelo y agregarlo a la botella de agua destilada. tapa bien el frasco y ag铆talo para mezclar bien la soluci贸n.
etiquetar los tubos de ensayo est茅riles "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ -6". agregue 9 ml de agua destilada a cada uno de los tubos, usando una de las pipetas.
transfiera 1 ml de la soluci贸n en la botella al tubo etiquetado "10 ^ -3", usando una pipeta nueva. tapa el tubo y ag铆talo suavemente hasta que la soluci贸n est茅 bien mezclada.
transfiera 1 ml de la soluci贸n en el tubo de ensayo "10 ^ -3" al tubo "10 ^ -4" con una nueva pipeta. tapa el tubo "10 ^ -4" y agita para mezclar. repita este m茅todo para transferir la soluci贸n del tubo "10 ^ -4" al tubo "10 ^ -5" y luego del tubo "10 ^ -5" al tubo "10 ^ -6".
placa tres muestras cada una de los tubos "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ -6". Utilice una nueva pipeta para transferir 1 ml de soluci贸n del tubo a una placa de Petri. a帽adir unos 15 ml de agar nutriente a la placa; luego coloque la tapa sobre la placa y g铆rela suavemente para que el agar cubra el fondo de la placa.
haga una placa de control colocando 1 ml de agua destilada en una placa petri, usando una pipeta nueva. a帽adir agar; Ponga la tapa y gire la placa.
Deje las placas petri en posici贸n vertical hasta que el agar se haya fraguado. luego invierta las placas e inc煤belas, ya sea en una incubadora oa temperatura ambiente, durante tan solo 24 horas y hasta cinco d铆as.
retire las placas de la incubadora despu茅s de la cantidad deseada de tiempo de incubaci贸n. contar las colonias bacterianas en placas que contienen alrededor de 30 a 300 colonias. use un marcador permanente para marcar las colonias que ya ha contado para evitar contar las mismas colonias dos veces.
divida el n煤mero de colonias contadas por la diluci贸n: "10 ^ -4," "10 ^ -5" o "10 ^ -6", de la soluci贸n de suelo para cada placa. encuentre el n煤mero de bacterias cultivables en el gramo original de suelo promediando los resultados de cada placa contable.
advertencia
Para evitar la contaminaci贸n y la posible infecci贸n de las bacterias, aseg煤rese de desechar adecuadamente todas las placas de petri, soluciones de suelo y pipetas.
Este procedimiento solo mide bacterias cultivables. seg煤n la Universidad de Cornell, entre el 90 y el 99 por ciento de las bacterias del suelo no crecer谩n en agar nutriente.