¿Cómo se aíslan las bacterias del suelo?

¿Cómo se aíslan las bacterias del suelo?

aislar bacterias del suelo es un primer paso importante en muchos experimentos de microbiología. Una vez que están aisladas, las bacterias pueden analizarse más a fondo para determinar cosas, como su especie y su función en el ambiente del suelo. incluso una pequeña cantidad de suelo puede contener millones de bacterias, lo que hace necesario diluir una muestra de suelo antes de aislar las bacterias de la muestra.

    medir 100 ml. Agua destilada en el cilindro graduado y agregarlo a la botella estéril.

    pesar 1 g de la muestra de suelo y agregarlo a la botella de agua destilada. tapa bien el frasco y agítalo para mezclar bien la solución.

    etiquetar los tubos de ensayo estériles "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ -6". agregue 9 ml de agua destilada a cada uno de los tubos, usando una de las pipetas.

    transfiera 1 ml de la solución en la botella al tubo etiquetado "10 ^ -3", usando una pipeta nueva. tapa el tubo y agítalo suavemente hasta que la solución esté bien mezclada.

    transfiera 1 ml de la solución en el tubo de ensayo "10 ^ -3" al tubo "10 ^ -4" con una nueva pipeta. tapa el tubo "10 ^ -4" y agita para mezclar. repita este método para transferir la solución del tubo "10 ^ -4" al tubo "10 ^ -5" y luego del tubo "10 ^ -5" al tubo "10 ^ -6".

    placa tres muestras cada una de los tubos "10 ^ -4", "10 ^ -5" y "10 ^ -6". Utilice una nueva pipeta para transferir 1 ml de solución del tubo a una placa de Petri. añadir unos 15 ml de agar nutriente a la placa; luego coloque la tapa sobre la placa y gírela suavemente para que el agar cubra el fondo de la placa.

    haga una placa de control colocando 1 ml de agua destilada en una placa petri, usando una pipeta nueva. añadir agar; Ponga la tapa y gire la placa.

    Deje las placas petri en posición vertical hasta que el agar se haya fraguado. luego invierta las placas e incúbelas, ya sea en una incubadora oa temperatura ambiente, durante tan solo 24 horas y hasta cinco días.

    retire las placas de la incubadora después de la cantidad deseada de tiempo de incubación. contar las colonias bacterianas en placas que contienen alrededor de 30 a 300 colonias. use un marcador permanente para marcar las colonias que ya ha contado para evitar contar las mismas colonias dos veces.

    divida el número de colonias contadas por la dilución: "10 ^ -4," "10 ^ -5" o "10 ^ -6", de la solución de suelo para cada placa. encuentre el número de bacterias cultivables en el gramo original de suelo promediando los resultados de cada placa contable.

    advertencia

    Para evitar la contaminación y la posible infección de las bacterias, asegúrese de desechar adecuadamente todas las placas de petri, soluciones de suelo y pipetas.

    Este procedimiento solo mide bacterias cultivables. según la Universidad de Cornell, entre el 90 y el 99 por ciento de las bacterias del suelo no crecerán en agar nutriente.



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