El prop贸sito de la electroforesis

La electroforesis es una "t茅cnica de separaci贸n molecular potente y econ贸mica", seg煤n lo declarado por el dr. william h. Heidcamp, en el manual de laboratorio de biolog铆a celular. Existen varias razones para llevar a cabo la electroforesis, incluida la uni贸n no invasiva a las mol茅culas y la visualizaci贸n de la separaci贸n de mol茅culas. En general, la electroforesis pretende proporcionar una forma precisa de analizar sustancias, como la sangre y el ADN (谩cido desoxirribonucleico, que son dif铆ciles de separar utilizando m茅todos convencionales).

definici贸n

La electroforesis es una t茅cnica emp铆rica utilizada en la separaci贸n de mol茅culas cargadas (positivas y negativas) como las c茅lulas y las prote铆nas, de acuerdo con su respuesta en la corriente el茅ctrica.

Varios factores afectan la electroforesis, incluida la carga neta, la masa de la mol茅cula, el tamp贸n y los medios electrofor茅ticos como el papel o el gel. En la electroforesis, las mol茅culas se mueven hacia la carga opuesta; por ejemplo, una prote铆na con una carga neta positiva se mueve hacia el lado negativo del medio electrofor茅tico. adem谩s, las mol茅culas con menor masa se mueven m谩s r谩pido o se separan m谩s r谩pido que las mol茅culas con mayor masa.

historia

En 1937, un cient铆fico sueco llamado Arne Tiselius desarroll贸 un aparato para medir el movimiento de las mol茅culas de prote铆nas, llamado aparato m贸vil de l铆mites. este es un aparato en forma de u que utiliza un medio acuoso para separar mol茅culas de prote铆nas.

en 1940, se introdujo la electroforesis de zona, que utiliza un medio s贸lido (p. ej., gel) y permite la tinci贸n para una mejor resoluci贸n o visualizaci贸n de la separaci贸n de mol茅culas.

luego, en 1960, la electroforesis capilar se desarroll贸 para proporcionar una t茅cnica de electroforesis vers谩til. este tipo de electroforesis permite la separaci贸n de mol茅culas utilizando medios acuosos y s贸lidos.

uni贸n de mol茅culas

La electroforesis, utilizando medios, interact煤a deliberadamente con las mol茅culas de una manera no invasiva. por ejemplo, los medios de gel se unen a mol茅culas de prote铆nas sin alterar la estructura y la funci贸n de las prote铆nas. Despu茅s de la uni贸n a las mol茅culas, el movimiento o la separaci贸n se inicia mediante la aplicaci贸n de corriente el茅ctrica. adem谩s, tambi茅n es posible recuperar las mol茅culas unidas al medio despu茅s de la electroforesis.

separaci贸n de alta resoluci贸n

La electroforesis est谩 dise帽ada para visualizar la separaci贸n de mol茅culas. Esto se logra mediante varios m茅todos, incluida la tinci贸n y la autorradiograf铆a.

la autorradiograf铆a utiliza pel铆culas de rayos X para visualizar la posici贸n de las mol茅culas radiactivas (p. ej., ADN) despu茅s de la separaci贸n. este tipo de visualizaci贸n es comparable a tomar fotograf铆as, en donde la radiograf铆a es como el flash de una c谩mara y la pel铆cula de radiograf铆a es como la pel铆cula que se usa para revelar fotograf铆as en blanco y negro. En la electroforesis, las fotograf铆as de mol茅culas como las prote铆nas en la sangre se desarrollan mediante autorradiograf铆a.

En la tinci贸n, los tintes como el azul de coomassie y el negro amido se mezclan con mol茅culas, antes o despu茅s del proceso de separaci贸n. por ejemplo, mezclar prote铆nas con colorante coomasie antes de la electroforesis producir谩 trazados te帽idos (puntos o l铆neas peque帽as) que muestran el movimiento de prote铆nas durante la separaci贸n.

an谩lisis cuantitativo

Otro prop贸sito de la electroforesis es obtener informaci贸n cuantitativa despu茅s de visualizar la separaci贸n de mol茅culas. para obtener datos cuantitativos, por ejemplo, el software de an谩lisis de im谩genes (software de renderizaci贸n 2d y 3d) registra los resultados de la electroforesis como se帽ales digitales. estas se帽ales representan la posici贸n de las mol茅culas antes y despu茅s de la electroforesis y luego se usan para el an谩lisis cuantitativo "in silico" (con el uso de una computadora).



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