La razón principal por la que tiñe una muestra antes de colocarla bajo el microscopio es para verla mejor, pero la tinción hace mucho más que simplemente resaltar los contornos de las células. algunas manchas pueden penetrar en las paredes celulares y resaltar los componentes celulares, y esto puede ayudar a los científicos a visualizar los procesos metabólicos. Las manchas también ayudan a distinguir entre células vivas y células muertas. además, la tinción permite que los científicos cuenten el número de células de un tipo particular dentro de una biomasa determinada. Existen veinte o más tipos diferentes de manchas, y cada una tiene su propósito.
tipos de manchas
La elección de la mancha depende de lo que estés buscando. no todas las tinciones son adecuadas para las células vivas, pero las que se incluyen son marrón bismarck, rojo tolueno, azul nilo y rojo nilo, y ciertos fluorescentes utilizados para resaltar el ADN. Algunas manchas resaltan las esporas, otras detectan lípidos y proteínas y otras cambian de color en presencia de almidones. El propósito del examen determina el mejor tipo de mancha a utilizar. por ejemplo, un médico que realice una prueba de Papanicolaou usaría eosin y. es un tinte fluorescente ácido que se vuelve rojo cuando entra en contacto con los glóbulos rojos, el citoplasma y las membranas celulares. También se usa para examinar la médula sanguínea.
en algunos casos, un investigador puede usar más de una mancha. por ejemplo, la hematoxilina es una mancha que convierte los núcleos celulares en azules. Cuando se usa junto con la eosina, que hace que las otras partes de la célula se vuelvan rojas o rosadas, proporciona un contraste más fuerte y hace que los núcleos sean más fáciles de diferenciar. Las pruebas de Papanicolaou y las muestras de médula sanguínea son más fáciles de examinar cuando estas dos manchas se usan juntas.
Tinción de Gram: los trabajadores del hospital usan la tinción de Gram para identificar bacterias dañinas. En realidad, se trata de una serie de colorantes que tienen diferentes efectos sobre diferentes tipos de bacterias y brindan a los médicos una importante herramienta de diagnóstico. La tinción de Gram es un proceso de tres partes. en el primero, se agrega el cristal violeta de Hucker, que tiñe a todas las bacterias de un color violeta uniforme. en la siguiente etapa, se agrega tinción de yodo, que hace que el color se adhiera a las células grampositivas, que son principalmente estafilococos y estreptococos. la mancha se elimina por lavado, dejando las células grampositivas con un color violeta claro; luego se introduce una tercera tinción, safranina o, para mejorar el contraste entre las bacterias gramnegativas y el resto del material en la diapositiva.
procedimiento de tinción
Al preparar una muestra en una diapositiva, puede montarla en seco o en húmedo, puede cortarla en una sección delgada o puede mancharla. cuando se usa una mancha, el procedimiento habitual es montar la muestra en húmedo, lo que significa colocar una gota de agua en el portaobjetos, colocar la muestra en el agua y cubrirla con un cubreobjetos. luego aplica la mancha en una esquina de la diapositiva con un gotero y permite que se atraiga hacia la muestra mediante una acción capilar. Ayuda a poner una toalla de papel en el lado opuesto de la diapositiva para atraer el agua. Una vez que la mancha se ha extendido por todo el portaobjetos, la muestra está lista para su examen.