Prop贸sito de la soluci贸n de lisis celular

Prop贸sito de la soluci贸n de lisis celular

Las c茅lulas son las unidades estructurales y funcionales b谩sicas del cuerpo humano. Contienen varias partes diferentes llamadas org谩nulos que contribuyen a la capacidad de la c茅lula para operar. la energ铆a es proporcionada por las mitocondrias, las prote铆nas se sintetizan en los ribosomas, el ADN est谩 contenido en el n煤cleo y as铆 sucesivamente. Si un cient铆fico est谩 interesado en estudiar un componente particular de uno de estos org谩nulos, es necesario abrir la c茅lula, o lisarla, para aislar los org谩nulos de inter茅s del resto de la c茅lula.

lisis celular

Las c茅lulas animales est谩n unidas por una membrana celular semipermeable. En el interior de la c茅lula, los org谩nulos se suspenden en un l铆quido llamado citosol o citoplasma. El citosol contiene az煤cares, sales, prote铆nas solubles y las prote铆nas estructurales del citoesqueleto, una estructura que mantiene la forma celular. La membrana celular puede romperse, o lisarse, mec谩nicamente, qu铆micamente o por alguna combinaci贸n de los dos. Para la lisis qu铆mica, las c茅lulas se suspenden en una soluci贸n que contiene detergentes y / u otros reactivos que interfieren con los enlaces qu铆micos que mantienen unidas a las prote铆nas de la membrana. esto resulta en la ruptura de la membrana y la liberaci贸n de componentes intracelulares.

fraccionamiento subcelular

Una vez que las c茅lulas se han lisado, es necesario separar el org谩nulo o prote铆na de inter茅s del resto de los componentes. La centrifugaci贸n diferencial usa la fuerza de la gravedad para separar los objetos por densidad. los tubos de ensayo que contienen soluciones celulares se giran en una centr铆fuga a rpms progresivamente m谩s altos (revoluciones por minuto), creando un sedimento o fracci贸n que contiene los org谩nulos m谩s pesados 鈥嬧媏n la parte inferior del tubo con cada giro.

purificaci贸n

Una vez obtenida la fracci贸n de inter茅s, debe ser purificada. la purificaci贸n elimina los contaminantes aprovechando las diferencias en las caracter铆sticas moleculares, como la carga, la forma o el tama帽o. por ejemplo, la fracci贸n de inter茅s puede contener dos prote铆nas que se acumulan juntas debido a las similitudes en la densidad a pesar del hecho de que tienen tama帽os muy diferentes. para separar la prote铆na no deseada de la que se estudia, ser铆a l贸gico utilizar otro m茅todo para aislar las prote铆nas por tama帽o.

relevancia para la enfermedad humana

La capacidad de lisar c茅lulas y separar componentes espec铆ficos ha proporcionado a investigadores m茅dicos y desarrolladores de medicamentos informaci贸n importante sobre la epidemiolog铆a de ciertas enfermedades humanas. por ejemplo, las membranas de las c茅lulas cancerosas se pueden comparar con las de las c茅lulas normales para desarrollar tratamientos que destruyan las c茅lulas tumorales pero que sean inofensivas para las c茅lulas sanas. La lisis celular tambi茅n se utiliza para estudiar la enfermedad de Alzheimer, los trastornos metab贸licos y mucho m谩s.

consideraciones

No todas las c茅lulas son iguales, por lo que es importante personalizar el protocolo utilizado para la lisis a las caracter铆sticas de su poblaci贸n celular en particular. Es igualmente importante considerar exactamente c贸mo planea estudiar el componente de inter茅s. Si desea analizar la actividad de una enzima, ser铆a il贸gico utilizar una soluci贸n capaz de destruir la funci贸n de la enzima. Los fabricantes de kits de reactivos qu铆micos utilizados para la lisis celular generalmente se complacen en ayudarlo a determinar sus necesidades.



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