dna, el ácido desoxirribonucleico, es una molécula dentro del núcleo de una célula que contiene información genética. extraer ADN implica una serie de pasos para romper suavemente la célula, romper la membrana nuclear, separar el ADN de las proteínas y luego hacer que se precipite de una solución. Esto se logra utilizando varios productos químicos, basados en la estructura de las membranas, el ADN y su electronegatividad. El cloruro de sodio, u otros compuestos que contienen sodio, se usan para estabilizar el ADN después de que se le ha quitado sus proteínas y ayuda en la precipitación.
la estructura del ADN
La estructura básica del ADN son dos cadenas largas de nucleótidos unidas por cadenas principales de azúcar-fosfato que los rodean. el ADN se organiza además girando y enrollando sobre sí mismo, con varias proteínas asociadas para mantener las hebras organizadas y desenredadas. en su estado nativo, la porción de ADN más estrechamente expuesta al medio ambiente es la columna vertebral de azúcar-fosfato. dentro de la célula, ese ambiente es principalmente agua; en el que el ADN es soluble. es soluble en agua debido a su polaridad total.
polaridad del ADN
"polaridad" es un término químico que describe moléculas que contienen una distribución desigual de cargas eléctricas. Según Paul Zumbo de Cornell Medical College, todos los ácidos nucleicos son polares. En el caso de ADN, los grupos fosfato altamente polares en la columna vertebral llevan cargas negativas. Esta propiedad representa la solubilidad en agua, ya que el agua también es polar. Las cargas positivas del agua interactúan con las cargas negativas del ADN y crean una solución. Para recuperar el ADN para una prueba o visualización adicional, el ADN debe precipitarse de una solución con agua. ya que el agua tiene una carga positiva relativamente débil, esto se logra al proporcionar un ión con carga positiva más fuerte en la solución. El sodio es el candidato perfecto para esto.
Precipitación de ADN usando sodio y alcohol.
Una vez que se elimina el ADN del núcleo de una célula y se deja mezclar con agua, la introducción de iones de sodio crea una atracción temporal entre el sodio y la columna vertebral. el ADN se neutraliza temporalmente y luego se disocia fácilmente del agua. En esta etapa, la introducción de un alcohol obliga a los iones ADN y sodio a unirse aún más estrechamente, ya que el alcohol es muy polar. Se puede usar etanol o alcohol isopropílico. Una vez que el ADN se separa del agua y se une fuertemente al sodio, precipitará fuera de la solución, donde puede concentrarse para la purificación o visualizarla enrollando suavemente alrededor de una varilla de vidrio suave.
Otros pasos en la extracción de ADN.
La descomposición de la membrana plasmática y la membrana nuclear para acceder al ADN desde las células generalmente se logra introduciendo primero un detergente de algún tipo para romper las moléculas de lípidos. un detergente común usado en laboratorios es sds, o dodecilsulfato de sodio; pero para extracciones simples, incluso se puede usar jabón para lavar platos. Si las células se derivan de material vegetal, también se suelen agregar enzimas para digerir la pared celular.